О чашках с агаром Сабуро
Я думаю, это может быть интересный пост для некоторых из вас. Я расскажу некоторые подробности о своей технике работы с чашками с агаром. Но я не буду вдаваться в подробности, просто сделаю краткий обзор. Я изучил это в лаборатории, поэтому следующие действия являются очень простыми микробиологическими методиками.
Что касается сред, я обычно использую агар Сабуро. Это среда для выращивания дрожжей и некоторых других бактерий. Агар состоит из следующих компонентов [г л -1 ] (при использовании в концентрации 65 г порошка на 1 литр воды):
10 г мясного и казеинового протеина, 40 г глюкозы, 15 г агара, pH около 5,6 +/- 0,2 (согласно этикетке). Производство Carl Roth GmbH, Карлсруэ, Art. № X932.1, Sabouraud — 4% — глюкозный агар, Ph.Eur . fd Mikrobiologie, Agarmedium C.
Почему Сабуро? Сначала я попытался приготовить свой собственный солодовый агар из высушенного солодового экстракта и агара, но твердость агара оказалась очень непостоянной. И раньше я использовал Сабуро в лаборатории для культивирования дрожжей.
Процедура:

Он начинается с добавления 26 г [hide]смеси Сабуро в 400 мл водопроводной воды. Я использую бутылку Schott на 500 мл и скороварку и кипячу все это примерно 15 минут, чтобы стерилизовать среду. Затем я даю ему остыть в кастрюле, пока давление не вернется к норме, достаю грелку и даю ей остыть. (обратите внимание, что подсос воздуха происходит не через санирующий или какой-никакой фильтр, а просто через щели. Если скороварка/автоклав хорошо герметизируются, то открывая можно получить сильный поток воздуха вовнутрь, что может инфицировать ваши среды. Прим.MrD`Anger)
Когда температура агара составляет примерно 50 ° C, я наливаю около 20 мл среды в чашку Петри (я использую пластиковые чашки Петри Greiner диаметром 94 мм с отверстиями) и даю ему остыть. 400 мл должно хватить на 20 чашек, но у меня всегда меньше. Вот и все, что нужно сделать, чтобы получить чашку Петри с агаром, на которую можно засеять культуру.
Я беру инокуляционную петлю, которую нагреваю на газовой горелке до красного цвета, даю ей остыть, пока красный цвет не исчезнет, и втыкаю петлю в агар, чтобы охладить ее. Затем я беру колонию, немного жидкости или что-то еще, что я хочу посеять на чашку. Я обычно использую технику истощающего штриха, чтобы впоследствии получить единичные колонии. Это упрощает определение морфологии колонии и различение различных микроорганизмов (см. Рисунок ниже).
И у меня нет причудливой подставки для посева в потоке (как я понимаю, имеется в виду специальная вращающаяся подставка для посевов, типа таких или таких. Прим.MrD`Anger). Я просто использую кусок стекла в качестве основы, которую можно протереть спиртом. Самая важная часть работы в потоке — это работать быстро. Просто откройте чашку на очень короткое время, чтобы не осталось полос, и снова закройте. У меня эта техника работает, тарелок с плесенью и другими загрязнениями очень мало.
После нес
кольких дней инкубации при комнатной температуре чашка может выглядеть как слева. Как уже упоминалось, преимуществом истощающего штриха является то, что вы получаете отдельные колонии. Колония — это отдельная точка. Это легко заметить на картинке слева. Одиночные колонии находятся в правом верхнем углу. Типичная дрожжевая колония выглядит (по моему опыту): круглой, от белого до кремового цвета, ровной, выпуклой, слегка глянцевой и диаметром около 2 мм. О терминологии:
- Круговой: определяет форму колонии. Колонии также могут иметь неправильную форму.
- Равномерное: определяет границы колонии. Некоторые колонии могут быть волнистыми, нитевидными и т. Д.
- Выпуклый: описывает высоту колонии. Некоторые колонии плоские, некоторые выпуклые, полушаровидные, приподнятые и т. Д.
Вот как я готовлю свои чашки Сабуро и использую их для выращивания и скрининга различных дрожжей и некоторых бактерий.
[/hide]
Обсудим?
«Спасенная» с сайта eurikabrewing.com


